中文名称:人结肠癌细胞CACO-2红色荧光标记BALB/cA-nu小鼠模型
英文名称:CACO-2-DsRed
类型:结肠癌动物模型
分级:NA
用途:用于结肠癌研究。
研制单位:中国医学科学院医学实验动物研究所
保存单位:中国医学科学院医学实验动物研究所
结肠腺癌是结肠腺上皮来源的常见消化道恶性肿瘤,属于结肠癌多种病理类型中的一种。
结肠腺癌起病隐匿,早期仅见粪便隐血阳性,逐步为血便、痢疾样脓血便,里急后重。病人常有不同程度的腹痛,常有糜烂、坏死和继发性感染,如发生在右侧则会产生右腹部钝痛,有时出现餐后腹痛。左侧结肠癌常并发肠梗阻,时有腹部绞痛,伴有腹胀、肠鸣音亢进等。腹部肿块多见于右腹部,是右侧结肠癌的表现之一,提示已到中晚期,肿块表面可有结节感 ,一般可以推动,但到肿瘤晚期时则固定,合并感染时可有压痛。结肠癌的患者可出现进行性贫血,低热,进行性消瘦,恶液质,肝肿大、浮肿、结肠腺癌黄疸和腹水等。
BALB/cA-nu小鼠,胸腺缺失,为第11对染色体隐性遗传,T细胞免疫缺陷,B细胞正常,具有较高的NK细胞活力,无接触GFP敏感性,无移植排斥反应。
制作稳定高表达DsRed的细胞,在荧光显微镜下呈强荧光,并且荧光均匀分布于整个细胞内,传代数次后仍能稳定高水平表达DsRed(图1)。细胞形态和未转染细胞无明显区别。
图1红色荧光标记的CACO-2肿瘤细胞
模型制作采用BALB/cA-nu裸小鼠,鼠龄6周,体重16—20 g。 BALB/cA-nu裸小鼠在实验室无特定病原体饲养间饲养。收集处于生长对数期的CACO-2-DsRed肿瘤细胞,稀释至5×106cells/mL。取200μL细胞悬液进行皮下注射接种。分别在接种的7、14、21、28和35 d观察肿瘤的生长情况。在接种的第7天就可以观察到接种部位肿瘤发光,通过肿瘤组织发出的荧光的光子数可以确定肿瘤的大小,随着观察天数的增加,肿瘤的体积和发光强度增加 (图1)。28天后肿瘤中心区域荧光降低,显示肿瘤中心出现坏死。以肿瘤细胞发射的光子数对小鼠荷瘤时间作图,得到红色荧光蛋白标记CACO-2的肿瘤细胞在裸鼠体内的生长曲线(图2)。
图1皮下接种CACO2-DsRed肿瘤生长影像分析
图2荧光标记肿瘤的生长曲线
该小动物模型饲养在清洁级动物中,微生物处于监控状态,动物房有相应的保护措施,小鼠不会出现逃逸,不会对外界环境造成影响。